蟛蜞菊内酯，化学名称：7-甲氧基-5，11，12-三羟基苯并呋喃香豆素，【蟛蜞菊内酯的制备及药理研究】化学结构式如下，蟛蜞菊内酯是一种香豆素类化合物，具有保肝、抗炎、增强免疫力等作用。

1956年，戈文达查里等人发现它具有抗炎、止血、抗肺炎、抗肝硬化等功能，也可作为蛇毒的有效解毒剂。【蟛蜞菊内酯的制备及药理研究】哈佛医学院袁教授发现，蟛蜞菊内酯能抑制脂多糖诱导的caspase-11的诱导，可用于治疗感染性休克、中风等炎症性疾病。

1.目前，从墨旱莲中制备蟛蜞菊内酯的报道大多为实验室规模，步骤繁琐。例如，张金生等(中国药学杂志，36(1):34-37，2011)报道了用石油醚-乙醚-甲醇或95%甲醇渗漉提取，甲醇溶解除去杂质或乙酸乙酯提取除去杂质，硅胶柱分离，其中甲苯-丙酮用作分离洗脱剂，得到蟛蜞菊内酯

CN201310082363。x提供了一种工艺简单、易于规模化的新制备方法。墨旱莲的乙醇提取物经乙酸乙酯萃取、【蟛蜞菊内酯的制备及药理研究】中压或减压硅胶柱层析纯化和重结晶三步得到纯度大于98%的蟛蜞菊内酯化学对照品，其规模可达10克。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案如下：

1)乙酸乙酯萃取：

墨旱莲或墨旱莲的乙醇提取物用体积分数不低于70%的乙醇提取，减压干燥得到乙醇提取物，加入提取物重量3-5倍体积的水，加热溶解，温度控制在30-40；加入提取物重量1-2倍的乙酸乙酯提取，【蟛蜞菊内酯的制备及药理研究】重复提取2-4次，合并提取液，减压浓缩至醇提物重量的1/3-1/6体积(ml/g)，然后将等比例的硅胶(g/ml)混合，干燥，得到乙酸乙酯提取物干粉；

2)中压或减压硅胶柱色谱纯化：

以径高比为2-12.5的不锈钢柱为色谱柱，加载提取干粉重量1-2倍的硅胶作为色谱分离硅胶，进行干法取样；用石油醚乙酸乙酯乙酸(体积比8:233601-6:433601)、中压柱压0.2-0.3兆帕、减压柱压-0.08-0.09兆帕的混合溶剂洗脱，用薄层色谱法检测，用石油醚乙酸乙酯乙酸(体积比833601-63601)洗脱；

3)重结晶：【蟛蜞菊内酯的制备及药理研究】

将粗对照品用乙酸乙酯或甲醇溶解，在-4-10下静置结晶，得到纯度大于98%的蟛蜞菊内酯对照品，为白色粉末。

蟛蜞菊内酯是一种具有化学结构的多酚类内酯，在碱性条件下容易分解，因此很难从天然产物中提取纯化。报道了全合成的制备方法。1963年，德国学者万兹利克首次报道了邻苯二酚和4，5-二羟基-7-甲氧基香豆素催化环化制备蟛蜞菊内酯，但仅提供了红外数据。印度学者潘迪在1989年报道了类似的合成方法。他们使用从蘑菇中提取的酚氧化酶酪氨酸酶(EC1.14.18.1)作为催化剂，在pH6.8下使儿茶酚和4，5-二羟基-7-甲氧基香豆素环化，得到蟛蜞菊内酯。该合成方法收率高，但酶催化剂成本高，难以实现工业化生产。

根据现有技术的文献检索，中国发明专利(CN1566116)以3，4-二苯甲醛和2，4，6-三羟基苯甲醛为起始原料，合成了两个关键中间体，即取代苯乙炔和碘取代苯，通过Sonogashira偶联反应、环化和脱保护等得到蟛蜞菊内酯。该合成方法的关键中间体不易获得，合成成本高

CN200810033010。x提供了一种蟛蜞菊内酯的化学全合成方法，该方法具有原料易得、工艺简单、成本低廉的特点，适合工业化生产，克服了现有合成方法的缺点。

本发明是通过以下技术方案实现的：以易合成的2-溴-4，5-二苄氧基苯胺为原料，与取代苯乙炔进行索诺加希拉偶联反应，经重氮化和水解得到化合物2-[(4-甲氧基-2，6-二苄氧基苯基)乙炔基]-4，5-二苄氧基苯酚，然后进行环化

本发明方法包括以下步骤：

第一步，2-乙炔-5-甲氧基-1，3-二苄氧基苯和2-溴-4，5-二苄氧基苯胺在钯催化剂的作用下进行索诺加希拉偶联反应，得到2-[(4-甲氧基-2，6-二苄氧基苯)乙炔基]-4，5-二苄氧基苯胺

其次，将2-[(4-甲氧基-2，6-二苄氧基苯)乙炔基]-4，5-二苄氧基苯胺进行重氧化水解，得到化合物2-[(4-甲氧基-2，6-二苄氧基苯基)乙炔基]-4，5-二苄氧基苯酚；

第三步，在钯催化剂的作用下，将2-[(4-甲氧基-2，6-二苄氧基苯基)乙炔基]-4，5-二苄氧基苯酚与一氧化碳进行羰基环化反应，得到化合物2-[(4-甲氧基-2，6-二苄氧基苯基)-5，6-二苄氧基]-。

第四步，将2-[(4-甲氧基-2，6-二苄氧基苯基)-5，6-二苄氧基]-3-苯并呋喃羧酸甲酯在钯碳催化剂中氢化，得到2-[(2，6-二羟基-4-甲氧基苯基)-5，6-二羟基]-二羟基

第五步，2-[(2，6-二羟基-4-甲氧基苯基)-5，6-二羟基]-3-苯并呋喃羧酸甲酯在酸催化下酯化，得到蟛蜞菊内酯。

本发明采用2-溴-4，5-二苄氧基苯胺代替难以获得的碘取代苯进行Sonogashira偶联反应，中间体通过重氮化水解得到，降低了合成成本。在羰基环化反应中用二氯化钯代替昂贵的二碘化钯，反应中使用的钯催化剂被回收利用，大大降低了成本；在合成操作的各个步骤中，用重结晶代替文献中的柱层析，简化了操作过程，可实现工业化生产。

自1956年蟛蜞菊内酯首次从蟛蜞菊中分离纯化以来，人们一直将其作为一种潜在的药物单体进行研究，并逐渐发现其抗癌作用。研究表明，蟛蜞菊内酯能有效抑制前列腺癌、乳腺癌、垂体腺瘤等癌细胞的活性，杀死肿瘤细胞并诱导其凋亡。

此外，30mol/L蟛蜞菊内酯作用36h后，p-Caspase3、p53和p-STAT1基因的转录和翻译明显增强，但对STAT1的mRNA和蛋白表达无明显影响，表明蟛蜞菊内酯可激活A549细胞p-Caspase3、p53、p-STAT1等基因的表达，促进细胞凋亡。蟛蜞菊内酯降低A549细胞的存活率，呈剂量依赖性和时间依赖性，阻断细胞的G1期，增加细胞凋亡数目。獐牙菜内酯可上调A549细胞p-Caspase3、p53、p-STAT1等基因的转录和翻译水平，但对STAT1基因表达无明显影响，表明其对非小细胞肺癌有积极作用，其机制与周期阻滞和促进凋亡有关。

主要参考文献[1] CN201310082363。一种大规模制备蟛蜞菊内酯化学对照品的方法

[2] CN201810746471.5蟛蜞菊内酯在制备治疗肺癌产品中的应用研究方法

[3] CN200810033010。蟛蜞菊内酯的化学全合成方法