核酸外切酶是指几种水解酶亚类的通称(EC3.1.11.13.14.15.16)。它们催化单个核苷酸残基的水解，只水解脱氧核糖核酸或核糖核酸链的末端核苷酸。该酶在核酸的分解代谢、维持和修复中发挥重要作用，并可用于多核苷酸测序。一类催化核酸链末端磷酸二酯键水解以一个接一个切断核苷酸的酶。EC3.1.11~16 .根据底物特异性，可分为既能作用于脱氧核糖核酸又能作用于核糖核酸的脱氧核糖核酸外切酶、核糖核酸外切酶和核酸外切酶，有些外切酶从5’端一个接一个地切断3’核苷酸；有些从3’末端一个接一个地切掉5’核苷酸。其他人可能从5’或3’末端一个接一个地切掉5’核苷酸。

核酸外切酶具有以下四种催化活性：(1)3’5’外脱氧核糖核酸酶活性，特别适用于双链：核酸外切酶降解dsDNA平端、5’-突出端或切口，并从脱氧核糖核酸链的3’-末端释放5’-单磷酸核苷酸，产生单链脱氧核糖核酸片段。该酶对具有3’-突出端(至少4个碱基和3’-末端碳残基)、单链脱氧核糖核酸和硫代磷酸酯连接的核苷酸的脱氧核糖核酸(1)没有活性。2)3’-磷酸酶活性：ExoIII切除3’-末端的磷酸基团，产生3’-羟基。3)核糖核酸酶活性：ExoIII核酸外切酶活性，降解核糖核酸-脱氧核糖核酸杂交体中的核糖核酸链。4)去纯化/去嘧啶化-核酸内切酶活性：核酸外切酶(核酸外切酶)在去纯化或去嘧啶化位点切割磷酸二酯键，产生5’-末端无碱基的脱氧核糖5’-磷酸残基。核酸外切酶的切割速率很大程度上取决于反应温度、盐浓度和核酸与酶的摩尔比(4，8)。每个实验的优化条件都需要重新测试。

主要参考文献[1]农业词典