培养基的配制_培养基的配制与灭菌实验报告思考题答案

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培养基的配制_培养基的配制与灭菌实验报告思考题答案

2020-11-20币圈百科1504

【培养基的配制】牛肉酱和蛋白胨用于培养微生物和动物组织细胞建议使用液体培养基栽培植物,【培养基的配制】便于及时更换(用于植物组织培养的固体培养基,添加琼脂)向培养液中添加总营养物【培养基的配制】(水、碳源、氮源、无机盐),并向植物组织培养中添加激素如生长素具体配方比例也要参考大樱桃的生长周期和用途

原出版者晏子彩玲1101.LB培养基:///LPH是

0、如果制备了固体培养基【培养基的配制】,添加1.5%琼脂。

二、YEB培养基/(或)5g////LPH是

0、如果制备了固体培养基,添加1.5%琼脂。

Iii.n6D2培养基(2,4D浓度为2毫克/升)N6母液1 20×常量元素(1l)。

6、(NH

4、2so

4、母液2 40×常量元素()2H2O3.32gN6母液3 40×常量元素(500ml)∙7H2O3.7gB5微量元素I 100×【培养基的配制】微量元素(1L)10ml溶液a硫酸锰溶于400ml无菌水溶液b溶于400ml无菌水中,然后缓慢混合溶液a和溶液b,定容至1LB5微量元素ii 1000×微量元素(500mg)…5mb b5维生素I 100

1、普通玻璃仪器的制备用于制备培养基的吸管、锥形瓶、毛细管吸管、平板等玻璃仪器,使用前应先用肥皂水冲洗,【培养基的配制】然后用清水冲洗,备用。

(1)餐盘应用纸或布包裹,或用金属盒包装,高压蒸汽灭菌后于121℃干燥3min备用。(2)试管喷嘴应使用棉塞或硅氟塑料试管塞堵塞,然后再使用。

用高压蒸汽在121℃和20℃杀菌,然后烘干备用。(3)吸管和滴管应在吸入端塞一点棉花(防止污染物被吸出或橡胶帽内的气体污染),然后用纸包好或放入金属吸管筒内,然后在121℃高压蒸汽下干燥。其他玻璃器皿应按上述方法处理【培养基的配制】,也应放入金属圆筒中,在160℃下干热灭菌2h。

2、培养基的制备和保存(1)溶解一般应放在玻璃器皿或搪瓷中。

应加入蒸馏水,并远离水加热,以促进其溶解。加热时,应经常搅拌,以防烧焦。

当它溶解时,应该补充水。使用干培养基时,先将蒸馏水按一定量加入容器中,然后将一定量的干培养基称入水中【培养基的配制】,静置10-15分钟,搅拌摇动,然后加水。一般不要加热,必要时加热,但时间不宜过长,温度不宜过高,以免破坏部分营养物质。

2、pH校正(pH调节)培养基必须有合适的pH,因此,测量pH是制备培养基的重要步骤之一。

测量酸碱度的标准温度是25.2℃。可用无菌1mol/l氢氧化钠溶液、10%碳酸钠溶液和1mol/l盐酸溶液调节缓冲溶液的pH值。

调节缓冲溶液的酸碱度时,应使用6摩尔/升磷酸或10摩尔/升氢氧化钾溶液。【培养基的配制】灭菌后的pH值会比灭菌前高或低。通常,高压灭菌前培养基的酸碱度将比最终的酸碱度高约

2、灭菌后基本适合。

因此,在灭菌前后测量培养基、缓冲液和试剂的酸碱度,并记录每次酸碱度测量的结果,有助于积累数据,【培养基的配制】考察每种培养基、缓冲液和试剂对灭菌程序的耐受性,从而指导灭菌前的酸碱度调节。

干培养基的pH值一般已经校正,使用时必须再次验证。测量时,一般需要将指示剂滴入培养基中,观察其颜色变化,或用酸度计校正。

如果不符合要求的酸碱度,可以用上述酸或碱液进行校正。调好pH后,【培养基的配制】要加热过滤,使培养基澄清。(3)培养基分装用于批量制备的自动分配器必须经过校准和确认。

每次使用前后,应清洗分配器的管道系统。分装无菌培养基前,应使用无菌硅胶管。固体培养基一般分装在250ml和500ml锥形瓶中。

高压灭菌后,根据需要分割平板或试管。平板将平板倒入无菌室3-4小时。如果使用塑料板,必须在35℃的培养箱中倒置30-60分钟。

让水蒸气自然蒸发。斜率准备一个较低的斜率,分成试管【培养基的配制】,约占体积的1/

5、灭菌后趁热放在细玻璃棒和木棒上,这样做坡。

注意喷嘴和瓶塞。

为了避免污染。高位斜面准备高位斜面,装入试管,约占试管体积的1/

3、灭菌后趁热放入高位短斜面,凝固后涂抹。

包装好的培养基或缓冲液及时密封后,必须在配制当天灭菌(最好在2h内)。

液体和半固体培养基一般在高压灭菌前装入试管,【培养基的配制】约占试管体积的1/

3、灭菌后,应加入含有其他成分的液体和半固体培养基。【培养基的配制】灭菌后,包装在灭菌的试管或锥形瓶中。【培养基的配制】培养基灭菌高压蒸汽常用于铜的灭菌


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