超氧化物歧化酶_超氧化物歧化酶偏高是什么意思

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超氧化物歧化酶_超氧化物歧化酶偏高是什么意思

2020-11-12币圈百科470

【超氧化物歧化酶】这种情况说明身体的抗氧化能力被削弱了。【超氧化物歧化酶】建议多参加活动,多吃健康食品,规律生活。

【超氧化物歧化酶】超氧化物歧化酶的测定超氧化物歧化酶(SOD)的催化底物是O

2、一般以一定时间内产生的产物量或消耗的底物量作为酶活单位。

由于O2本身不稳定,制备困难,所以测定SOD的方法除直接法外,【超氧化物歧化酶】都是间接法。

1、直接法的原理是根据O2或产O2物质的性质来确定O2的歧化量,【超氧化物歧化酶】从而确定SOD的活性。

经典的直接方法包括脉冲辐射分解、电子顺磁共振和核磁共振。

由于所需仪器设备价格较高,【超氧化物歧化酶】一般很少使用。

2、一般化学方法这些方法的共同特征是具有O2生成系统和被O2还原或氧化的可检测系统。

在有SOD存在的情况下,一部分O2被SOD歧化,【超氧化物歧化酶】因此抑制了O2还原或氧化检测系统的反应。根据抑制程度测定超氧化物歧化酶的活性。一般化学方法有邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、羟胺法、黄嘌呤氧化酶-NBT法、【超氧化物歧化酶】肾上腺素法、没食子酸法、6-羟基多巴胺法、亚硝酸盐生成法、碱性二甲亚砜法。

常用的方法有(1)邻苯三酚自氧化法一种改进的方法。该原理基于经典的分光光度法。在碱性条件下,【超氧化物歧化酶】邻苯三酚自氧化成柠檬醛。

波长、420nm或650nm(经典的420nm),同时产生O2。

SOD催化O2的歧化反应,从而抑制邻苯三酚的自氧化。【超氧化物歧化酶】样品对邻苯三酚自氧化速率的抑制率可以反映样品中的SOD含量。

该方法具有特异性强、样品量少(仅50μl)、操作快速简单、重复性好、灵敏度高、试剂简单等优点。

(2)细胞色素C还原法原理是黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统产生的O2将一定量的氧化细胞色素C还原为还原细胞色素C【超氧化物歧化酶】,在550nm处光吸收最大。在SOD存在下,由于部分O2被SOD催化歧化,O2还原细胞色素C的反应速率相应降低,即其反应受到抑制。

抑制曲线可以通过绘制抑制反应与超氧化物歧化酶浓度的百分比来获得【超氧化物歧化酶】,由此可以计算样品中超氧化物歧化酶的活性。该方法是经典的间接法,但灵敏度低。

3、化学发光法的原理是黄嘌呤氧化酶催化底物黄嘌呤或次黄嘌呤氧化,同时产生尿酸和O

2、后者可以与化学发光剂鲁米诺反应,使其兴奋。

超氧化物歧化酶能消除O2,抑制鲁米诺的化学发光。【超氧化物歧化酶】该方法可用于超氧化物歧化酶的微量测定,不仅灵敏简单,而且特异性和准确性与细胞色素C还原法相似。

4、免疫学方法上述方法测定超氧化物歧化酶活性,而免疫学方法可以测定样品中超氧化物歧化酶的质量,因此具有较好的特异性,是测定超氧化物歧化酶的理想方法。

免疫学方法包括放射免疫法、化学发光免疫法、酶联免疫法等。

但其缺陷是只能确定抗体的相应抗原。【超氧化物歧化酶】检测不同种类的超氧化物歧化酶,需要制备相应的特异性抗体,程序繁琐。

5、电泳染色定位法的基本原理是基于光化学法和NBT还原法。电泳采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳。可以使用超氧化物歧化酶活性的阳性染色(显示棕色带)或超氧化物歧化酶活性的阴性染色(显示无色透明带)。

根据凝胶电泳分离的超氧化物歧化酶带的颜色深度和面积,可以对样品进行半定量分析【超氧化物歧化酶】,也可以制作校准曲线来计算样品中超氧化物歧化酶的含量。染色定位法常用于超氧化物歧化酶的鉴定,但很少用于定量。主要是没有化学法那么简单,但比化学法鉴定SOD要好。

电泳可用于鉴定SOD是否混有杂质蛋白和同工酶,SOD活性可半定量测定。


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