【蛋白marker】非蛋白marker和蛋白marker有很多区别，【蛋白marker】其中最重要和最明显的区别是，非蛋白marker跑凝胶后，版一定会染色脱权限色，蛋白marker跑凝胶后，染色脱例如【蛋白marker】，有些蛋白marker变成彩虹色，区分分子量的大小。

这些蛋白质混合物与蓝色染料共价键合。【蛋白marker】凝胶电泳时出现强度均匀的8带。

蛋白质marker与未蛋白质marker相比，通过与染料的共价键，sds-page电泳时的移动特性有一些变化。

一、未预染色的Marker是广分子量蛋白基准、【蛋白marker】高分子量蛋白基准及低分子量蛋白基准。

二、预染的Marker是单色预染和多色预染。

在western Blot的过程中，分子量Marker不像螺钉那样细节，但这样的细节对实验结果起着不可忽视的作用。这个Western Blot参考家族的一员的作用主要是指示与蛋白质带对应的分子量的大小，【蛋白marker】标准量正确，实验结果有说服力，此外，蛋白质标准表示转移成功和蛋白质在凝胶上的电泳程度等

一般来说，蛋白分子量基准可以分为未染蛋白分子量基准、预染蛋白分子量基准两个阶段。

以下是关于蛋白质分子量标准的叙利亚。

1.预蛋白分子量基准未染色的蛋白分子量基准是最简单、【蛋白marker】最正确的一种。

因为没有附属染料分子和标记分子，所以表示的大小是蛋白质本来的大小，为了正确判断蛋白质的大小是必要的。

现在的marker大多选择预混合的marker，便于比较不同大小的蛋白质。【蛋白marker】预混合的Marker通常指示几个波段的两倍浓度。混合的乐队越多，就越难记住。谁知道哪个是那个。

数到眼睛都烟了。所以，看到很浓的几个标识带我就记得在哪里。

但记住，小乐队通常不那么容易看。在选择方面，当然【蛋白marker】，其中至少一条乐队选择接近自己目的蛋白质大小的是最好的。越近越好。如果你的蛋白质不幸在两个跨度大的Marker带之间，那就选另一个Marker吧。

预混合的Marker不如预染Marker(pre-stained)容易使用。电泳中完全看不见，必须和目的蛋白质一起等到最后染色“荧光”，不能预示实验。完全是“后知后觉”型，当然最好不要在不知情的情况下进行核对。宽分子量蛋白质标准从实验室整体来看，选择范围尽可能广，带分布比较均匀，所以你的蛋白质在任何区间都容易判断，可以避免正好落入空白区域的危险。

但是，带越多，每次提高样品量都要花费。拿到Marker后，如果购买了大包装，应该考虑分装。反复冻结融化对蛋白质来说是危险的，这是不言而喻的吧。

另外，宽光谱的Marker不一定能看到一切，特别要记住Mini Cell。聚焦于大蛋白质时，那个小东西可能已经跑了。并不是质量不好哦。高分子量蛋白质标准通常用于检测大分子量蛋白质，常用于高分子量蛋白质标准。低分子量蛋白质标准在一般的蛋白质电泳中，经常使用低蛋白质标准分子量，除了具有显示蛋白质大小的作用外，有时还可以用于粗略的定量

实验室用于一般蛋白质电泳的低分子量蛋白质标准。低分子量蛋白质基准还包括30kD以下的蛋白质和多肽的分离判别等特别小的蛋白质基准。其中GE的2kD到16kD之间有6条蛋白标准是很好的。另外，特别小的蛋白Marker带如果想着色的话，如上所述一定要加入足够的量哦。

2.预染蛋白分子量标准预染蛋白分子量是精制的蛋白质混合物，通过与染料共价键，可以在电泳中或转膜时直接观察。预染色蛋白分子量的出现便于我们的实验，该蛋白分子量标准有助于监测电泳时、电泳后、膜转移后的电泳状况和推测迁移率——。例如，已知垂直电泳的最佳分辨率区域约为糊的2/3，如果使用预染色Marker，则可以在目标蛋白进入的最佳分辨率区域停止电泳，得到最佳分辨率。

如果观察到Marker电泳异常，可以立即结束电泳。

另外，在Western Blot转膜后可以直接观察蛋白转膜是否完全，因为可以在膜上标记蛋白分子量，所以很多实验室的人都购买了预染蛋白标准。

值得注意的是，由于预染蛋白Marker与染料共价键合，因此在不同的缓冲条件下电泳时移动特性会发生变化，可能会导致一些偏差，因此不太适合精确定位蛋白——，但在很多情况下，最终需要Western，所以如果不是区分大小相近的乐队，对Marker进行预染色很方便，也可以和无染色的蛋白质标准一起使用。

预染蛋白标准可分为两类。

单色预染和多色预染的实际区别在于，越有助于识别实验中的带的大小——Marker带，参考价值就越大，越难区分，越用不同的颜色区分就越容易理解。

如果在无聊的电泳实验中跳出五颜六色的彩虹Marker，一定会有快乐的感觉！

单色Marker通常利用其中几个频带的两倍浓度来提示其大小。请再注意一点。因为转印膜将胶水中的Marker浓缩成白色的胶卷，所以需要的样品量比较少，如果想在电泳中看到美丽的“彩虹”，或者单色的Marker需要比说明书追加更多的Marker。

三、Western专用蛋白分子量标准生物素标记蛋白标准未染色的Marker在制作Western时，在印迹前用丽春红或SYPRO荧光蛋白染色液等不干扰Western Blot的染色方法而发色，糊

如果不直接在最后的结果中显示Marker的结果，手工绘制或拼接，则成为Western专用的Marker。比如生物素标记的蛋白质标准。

这种方法主要是配合化学发光法。

将生物素标记在蛋白分子量上，通过含有抗生物素蛋白或结合抗生物素蛋白的抗体，用化学发光检测目标蛋白带，可以同时看到对应的分子量基准，一起发光显影。与通常的蛋白分子量基准不同的廉价预染蛋白分子量的便利性，在与Marker和目的蛋白的对应性良好的同时，还具有显示在同一张纸上，即使不连接也有助于分析的优点。缺点是，如果样品带有生物素的背景，其抗生物素蛋白可能会影响结果，另外，反应体系太复杂会干扰实验结果。

特殊标记蛋白标准根据改变的蛋白质标准，除了生物素标记外，近年来，由于下游蛋白操作的丰富化和复杂化，也出现了带“尾巴”的蛋白质标准。例如His-Tag，如果各Marker带有His-Tag，其双抗添加His-Taq抗体容易在Western结果上显示Marker带。非常方便。问题是样品可能有潜在的干扰，例如正好有Histag那样的结构。

但是，这可以通过比对来检测。