【马度米星的效价检测及应用】抗体效价结果怎么看

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【马度米星的效价检测及应用】抗体效价结果怎么看

2020-07-20币圈百科873

马杜霉素,也称为马杜霉素,商品名为甲福,熔点为165-167。最初由美国亚利桑那州附近土壤中分离的微生物发酵而成,其盐具有抗球虫活性。它是白色结晶粉末,不溶于水,可溶于大多数有机溶剂。【马度米星的效价检测及应用】它属于单糖离子载体型抗体盒,对堆型、布鲁氏菌、巨型、温和、移位、柔嫩和有毒的艾美耳球虫有效,对某些革兰氏阳性菌也有效。

目前,抗生素生产领域中马杜霉素发酵液的效价检测采用基于体积的分光光度法。在该方法的第一步中,用标准移液管采集一定体积的样品。在检测过程中,由于发酵液有泡沫,需要提前加入消泡剂进行消泡处理;【马度米星的效价检测及应用】同时,发酵液中有时会有代谢产物晶体或由原辅料形成的大颗粒物质,这种分光光度滴定度检测的第一步是用移液管或吸管测量一定体积的发酵液进行浸提。加入消泡剂后,发酵液不仅存在均匀性问题,而且当使用标准移液工具移液时,发酵液中的大颗粒物质或大颗粒代谢物晶体也会导致较大的检测偏差。

基于体积的分光光度法测定效价不仅受发酵液的物理性质、发酵液温度、外界温度和人员操作差异的影响很大,而且需要用有机溶剂正丁醇预先脱泡,这不仅增加了检测成本和时间,而且对环境造成一定的污染。【马度米星的效价检测及应用】本发明针对基于体积的分光光度法检测马杜霉素发酵液效价存在的缺陷,提供了一种检测马杜霉素发酵液效价的方法。本发明提供的检测方法是基于重量的分光光度法,操作方便,数据准确,节能减排。

【马度米星的效价检测及应用】抗体效价结果怎么看

【马度米星的效价检测及应用】抗体效价结果怎么看

CN201110142472.7采用以下技术方案:

a  .首先将1毫升标准移液管枪的口径扩大,扩大后的1毫升移液管枪的口径为1毫升标准移液管枪的3-5倍,用处理后的1毫升移液管枪去除未经消泡处理的马杜霉素发酵液,用电子天平称取1.0克,将称取的马杜霉素发酵液放入容量瓶中,然后向容量瓶中加入1-2毫升无水甲醇;【马度米星的效价检测及应用】摇动容量瓶,使发酵液与无水甲醇混合均匀,然后加入适量无水甲醇混合均匀,加入适量无水甲醇后的无水甲醇总量占容量瓶体积的85-90%,将混合均匀的溶液超声提取8-12分钟或静置;

b、浸提或静置后,向容量瓶中加入无水甲醇,定容至容量瓶刻度线,定容后过滤混合溶液,得到滤液;

c  .用标准移液管将步骤b过滤后的滤液1毫升和香草醛溶液2毫升移入10毫升棕色容量瓶中,然后加入5-6毫升无水甲醇,摇匀,得到待测液体;

d  .用标准移液管将1毫升马杜霉素标准溶液和2毫升香草醛溶液转移到另一个10毫升棕色容量瓶中,然后加入5-6毫升无水甲醇,摇匀,得到标准溶液;

e  .向另一个10毫升棕色容量瓶中加入2毫升香草醛溶液和5-6毫升无水甲醇,摇匀得到参比溶液,作为分光光度计零点校准溶液;

f  .将步骤C、d、e中分别制备的待测液体、标准液体和参比液体放入68-72的水浴锅中,水浴加热22-28分钟,水浴加热后取出,冷却至室温,冷却至恒量后分别加入无水甲醇至10毫升棕色容量瓶刻度线;

g  .用分光光度计分别测量步骤f处理后的待测液、标准液和参比液的吸光度,最后根据效价公式计算效价。

本发明的积极有益效果是:

1.采用重量分光光度法检测马杜霉素发酵液的效价,操作简单、数据准确、省时、减少污染。通过本发明的技术方案,可以准确、快速地检测抗生素马杜霉素发酵液的效价。该检测方法操作简单,节省检测时间,可用于抗生素发酵企业。

2.采用本发明的技术方案检测马杜霉素发酵液的效价,不需要用有机溶剂正丁醇对马杜霉素发酵液进行脱泡,不仅避免了因异物造成发酵液不均匀的缺陷,还避免了有机溶剂正丁醇造成的环境污染;因此,降低了检测发酵液效价的成本和时间。因此,本发明具有一定的经济效益和社会效益。

3.本发明的技术方案通过加大标准移液管枪头的口径,使得含有大颗粒的马杜霉素发酵液能够均匀的转移到容量瓶内,克服了小口移液管因大颗粒而无法将均匀的发酵液转移到容量瓶内的缺陷。

4.本发明的检测方法能有效缩短劳动时间,提高检测精度,节能减排,并能有效解决不同泡沫大小和发酵液温度不一致的问题。

马杜霉素可用于制备马杜霉素铵预混剂

现有的马杜霉素铵预混剂或固体分散体的制备方法是将马杜霉素铵原料药与载体混合或溶于有机溶剂后喷洒在载体上,消耗大量的有机溶剂(每吨预混剂消耗30-50公斤乙酸乙酯和30-50公斤苯甲醇),生产成本高,存在安全隐患, 且生产过程中产生抗生素细菌残留(每吨预混料约200-300个),提供了一种不使用有机溶剂、污染小、生产安全、生产成本低的马杜霉素铵预混料的制备方法。

实施例1:通过湿法混合制备马杜霉素铵预混物的方法,以成品中马杜霉素活性成分的质量含量为1%为例,将在下面详细描述。见表1和表2。

首先,马杜霉素发酵液的制备:将马杜霉素产生菌接种到种子罐中,每级分级扩大培养40-72小时,按接种率6-20%接种到发酵罐中,以发酵液与空气的体积比为10.6-1通入空气,控制发酵温度在31-33,以120-140转/分钟的转速搅拌

取1000升马杜霉素铵发酵液,每升发酵液含15克马杜霉素。【马度米星的效价检测及应用】用氨水调节酸碱度至8-10,加入77公斤硅藻土助滤剂,用隔膜压滤机压滤,控制最大压滤压力为1.2兆帕,压滤后得到180公斤滤饼,将滤饼粉碎,过20目筛,然后在流化床中干燥,入口空气温度为120-140,出口空气温度为30-70,得到干燥的菌丝体产品(即干燥的滤饼)。48999.98999999999

将干燥菌丝体粉碎,与1235公斤二水硫酸钙、10公斤羧甲基纤维素钠和250公斤水混合,湿法制粒,过24-100目筛,用高效流化床干燥,进风温度为100-120,出风温度为30-60,干燥后含水量为10%,产品检测指标见表2。

本发明的积极有益效果是:

(1)经检测,本发明得到的马杜霉素铵预混产品符合兽药典质量标准的要求,符合出口标准,产品质量符合规定要求。

(2)本发明将含有马杜霉素的发酵液过滤,将滤饼干燥、粉碎并加入载体,采用干法或湿法造粒。生产过程中不使用有机溶剂,不产生母液、抗生素残留等危险固体废弃物,生产安全性高,同时减少了环境污染和后期处理成本。

(3)与传统方法相比,本发明减少了马杜霉素铵提取精制过程中结晶母液和发酵菌体中马杜霉素的损失,从而降低了生产成本。该方法投资少,具有较好的经济效益和社会效益。

主要参考文献[1]化学与化学工程词典(一)

[2]马杜霉素铵预混剂的制备方法

[3]马杜霉素发酵液效价检测方法

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