【通用引物】通用引物和特异性引物的区别

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【通用引物】通用引物和特异性引物的区别

2020-10-22币圈百科2648

【通用引物】UPM通用引物上的部分序列与合成RACE第一链时加【通用引物】入SMART低聚物酸序列通用接头引物的SMART低聚物酸序列互补。smartTM3'-race的原理是以mRNA'末端的poly(A)尾巴为一个引物结合部位,锁定连接有SMART低聚物酸序列公共连接器引物的Oligo(dT)30MN的引物逆转录合成标准的第一链【通用引物】CDT GSP)使用包含部分连接器序列的通用引物UPM(universal primer,UPM)作为上游引物,以cDNA的第一链为模板进行PCR循环,扩展了目的基因3末端的DNA片段。smartTM5'-race的原理是,首先以mRNA'末端的poly(A)尾巴为引物结合部位,以Oligo(dT)30MN为锁定引物,【通用引物】通过逆转录酶MMLV,逆转录合成标准的第一链cDNA。利用这个逆转录记录。退火后(dC)残基与含有SMART寡核苷酸序列的Oliogo(dG)通用接头引物配对后,转换成连接SMART序列继续延长到铸模的通用接头(参照Figure 2)。

然后,作为上游引物使用包含部分连接器排列通用引物UPM(universal primer【通用引物】,UPM),作为下游引物使用gsp2genespecificprimer(GSP),【通用引物】将SMART第一链cDNA铸型,最终,从2个具有相互重叠序列的3'/5'-RACE产物中得到全长cDNA,或通过分析race产物的3'和5'末端序列,合成相应的引物来扩展全长cDNA。


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